Descripción

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Principio del método

La tinción de panóptico rápido es un método de tinción diferencial que permite la observación de las células sanguíneas. Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta. Se trata de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho más rápido.

Reactivos

Panóptico	Reactivos	Tamaño Envase	Referencia
Panóptico Nº1	Fijador verde	Envase de 1 Litro	FV500002.3011
Panóptico Nº2	Eosina Rápida	Envase de 1 Litro	ER090102.3011
Panóptico Nº3	Azul Rápido	Envase de 1 Litro	AR090102.3011

Condiciones de almacenamiento y estabilidad

Los reactivos almacenados a temperatura ambiente (15-25ºC) y protegidos de la luz son estables hasta la fecha de caducidad indicada. A temperaturas inferiores a 15ºC puede precipitar el colorante en este caso será necesario filtrar.

Precauciones

La solución fijadora contiene metanol por lo que es inflamable y tóxico por inhalación e ingestión.

Eliminar los residuos según la normativa legal vigente.

Técnica

– Preparar la extensión de sangre en el portaobjetos y dejar secar al aire.

– Preparar 3 cubetas con cada colorante.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una  el portaobjetos en la cubeta con el reactivo 1. Escurrir el exceso de colorante.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de reactivo 2.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de reactivo 3.

– Lavar con agua destilada y dejar secar.

– Observar al microscopio.

Resultados

Eritrocitos: color rosa pálido.

Plaquetas: color violeta claro.

Neutrófilos: núcleo violeta oscuro, citoplasma violeta claro con gránulos violeta oscuro.

Basófilos: núcleo violeta oscuro, gránulos violeta oscuro.

Eosinófilos: núcleo violeta oscuro, citoplasma violeta con gránulos rojizos- violeta.

Linfocitos: núcleo violeta oscuro, citoplasma un poco más claro.

Monocitos: núcleo violeta oscuro, citoplasma un poco más claro.

Notas sobre el uso

El número de inmersiones en las cubetas de los colorantes 2 y 3 puede ser modificado si se pretende aumentar las coloraciones rosas o violetas.

Guardar las cubetas del reactivo 1 tapadas ya que se puede producir la evaporación del reactivo y dar errores en la tinción.

Bibliografia

Lewis, S. (2008) Hematologia práctica. 10º edición. Elsevier.

Horobin RW. How Romanowsky stains work and why they remain valuable –including a proposed universal Romanowsky staining mechanism and a rational troubleshooting scheme. School of Life Sciences, The University of Glasgow. Biothecnic & Histochemistry 2011.

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